- 楚天生物基因表达定量PCR试剂盒采用SYBR GreenI实时荧光PCR进行定量。产品包含定量PCR引物和 PCR MasterMix, 试剂盒已经优化，可以直接使用。我们提供人和小鼠全基因组3万多个基因的实时荧光定量产品。
- 产品特点
引物经过精心设计
拥有检测基因所有转录本的引物和检测某一转录本的引物。您可按需选择。 --->例子
引物不含SNP位点，不会因为个体基因多样性而导致定量差别。
引物不在基因组重复序列。
专一性得到blast分析的验证，绝大多数引物在目标序列与非目标序列相差3个或以上碱基。
极大程度避免ＲＮＡ样品中残余的基因组ＤＮＡ对体系的影响。
产品经过仔细验证 查看部分基因的验证数据
PCR扩增曲线正常。
DNA熔解曲线呈单峰。
DNA凝胶电泳大小与设计大小吻合。
PCR扩增效率高。
- 图一： 随机选择的88个基因的扩增效率分布图，平均扩增效率为0.968, 标准偏差为0.062.
- 图二： 一个梯度稀释扩增曲线图
- SYBR实时荧光PCR定量原理
SYBR是一种荧光染料。在游离状态下，只有微弱荧光。与双链DNA结合后，荧光强度大大增加(最大吸收波长488nm，最大发射波长522nm)。利用这一特性，SYBR用来检测双链DNA分子的浓度。用于实时荧光PCR，则可实时监控双链DNA量的变化。在PCR过程中，随着循环数的增加，双链DNA分子逐渐增多，荧光信号呈S型逐渐增强。当荧光强度达到设定的阀值(threshold)时, 此时对应的循环数即为Ct值。实时荧光PCR利用Ct值进行定量。 - 数据分析方法
本产品采用经典的△△Ct法进行基因表达的相对定量。所谓相对定量，即比较基因在不同生理或实验条件下表达量的变化。按照常规，本产品利用参比基因（通常选择看家基因， housekeeping gene）来校正上样量或实验过程造成的差别。 具体公式为：
△△Ct = (Ct target-sample - Ct ref-sample ) - (Ct target-control - Ct ref-control)
Ct target-sample: 样品目标基因Ct值； Ct ref-sample: 样品参比基因Ct值；
Ct target-control: 对照品目标基因Ct值； Ct ref-control: 对照品参比基因Ct值；
样品目标基因表达量 / 对照品目标基因表达量 = 2 ^(-△△Ct)
- 产品组成
■ qPCR引物
■ SYBR MasterMix
■ 产品使用说明书
- 试剂盒不包含参比基因（看家基因）定量试剂。楚天生物优惠提供参比基因定量PCR试剂盒。除了常用的GAPDH和ACTB基因外，楚天生物还提供其它常用看家基因定量PCR试剂盒供您选择。
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